dinamis-BIOSENSORS-LOGO

BIOSENSORS dinamis heliX cyto Sistem Analisis Laboratorium Otomatis

dynamic-BIOSENSORS-heliX-cyto-Fully-Automated-Laboratory-Analysis-System-PRODUCT

Spesifikasi

  • Jeneng produk: heliX cyto
  • Produsen: Dynamic Biosensors GmbH
  • Versi: 1.0

Informasi produk

  • Sistem sito heliX dirancang kanggo Sitometri Interaksi sel siji (scIC) kanggo ngukur kinetika ikatan molekul sing dilabel fluoresensi kanggo target ing permukaan sel kanthi cara sing wis ditanggulangi wektu.

Pandhuan Panggunaan Produk

Nggunakake Chip heliXcyto

  • Chip heliXcyto ngemot saluran mikrofluida tunggal kanthi titik elektroda kanggo panangkepan lan pangukuran sel. Mesthekake panggonan seko sing tepat saka chip lan tindakake pandhuan kanggo njebak sel.

Pangopènan Chip

  • Gunakake Chip Pangopènan mung kanggo operasi reresik, testing, lan pangopènan. Aja nggunakake kanggo eksperimen kanggo nyegah kontaminasi.

Mlaku Buffer

  • Gunakake Running Buffer 1 (RB 1) sajrone pangukuran. Deleng lembar kompatibilitas scIC ing pandhuan utama kanggo informasi rinci.

Analisis Sensorgram

  • Ngawasi sensorgram ing wektu nyata ing piranti lunak heliOS sajrone pangukuran. Analisa respon neon liwat wektu kanggo extract tarif kinetik.

Pasif

  • Coba nggunakake passivation minangka langkah opsional kanggo nyegah adsorpsi analit dening inkubasi reagen passivation ing chip.

Normalisasi

  • Normalisasi minangka proses standarisasi data kanggo perbandingan lan analisis. Tindakake prosedur normalisasi miturut manual pangguna.

PAMBUKA

heliXcyto Terminologi Sitometri Interaksi sel tunggal

  • Sitometri Interaksi sel tunggal (scIC) minangka teknologi sing ngukur kinetika ikatan molekul (analit) kanthi label fluoresensi menyang target (ligan) ing permukaan sel kanthi ngrekam sinyal fluoresensi kanthi cara sing wis ditemtokake.

Analit

  • Analit minangka molekul kanthi label fluoresensi ing fase seluler sing bisa ngiket target ing permukaan sel.

Ligand

  • Ligand" yaiku jeneng sing digunakake ing piranti lunak heliOS kanggo njlèntrèhaké target ing permukaan sel sing bisa diikat analit. Iki bisa uga minangka molekul reseptor, lipid, gula utawa molekul permukaan sel liyane.

Perangkap Sel

  • Perangkap sel minangka kandhang polimer sing bisa ditembus aliran, biokompatibel ing chip heliXcyto. Padha dirancang kanggo njupuk lan immobilize sel ukuran beda saka bab 6 kanggo 25 μm ing saluran aliran. Trap sel kasedhiya ing 3 macem-macem ukuran: cilik, medium lan gedhe.

Chip heliXcyto

  • Kripik heliXcyto ngemot saluran mikrofluida tunggal kanthi bukaan ing saben sisih. Loro titik elektroda emas dumunung ing tengah saluran.
  • Siji titik dadi titik referensi, lan titik kapindho nggawa kandhang polimer biokompatibel 3D kanggo panangkepan sel lan dadi titik pangukuran. Titik pangukuran bisa ngemot 1 utawa 5 jebakan saka jinis sing padha.
  • Titik referensi ngidini referensi wektu nyata saka sinyal fluoresensi sing diklumpukake. Chip heliXcyto bisa digunakake maneh lan bisa digunakake.dynamic-BIOSENSORS-heliX-cyto-Fully-Automated-Laboratory-Analysis-System-FIG-1 dynamic-BIOSENSORS-heliX-cyto-Fully-Automated-Laboratory-Analysis-System-FIG-2

Pangopènan Chip

  • Chip Maintenance minangka chip mikrofluida saluran siji sing digunakake kanggo kabeh operasi reresik, testing lan pangopènan.
  • Operasi kasebut kalebu rutinitas Clean & Sleep, Wake Up lan Prime routine, System wash lan tes Fluidics. Chip iki ngirim ora digunakake kanggo nyobi nyata karo sel / solusi protein kanggo nyegah kontaminasi luwih saka chip.

Mlaku Buffer

  • Buffer mlaku yaiku buffer sing digunakake ing heliXcyto sajrone pangukuran. Panggunaan Running Buffer 1 (RB 1) umume dianjurake.
  • Mangga deleng lembar kompatibilitas scIC sing ditemokake ing pandhuan utama kanggo informasi luwih lengkap.

Sensorgram

  • Sensorgram scIC minangka plot respon fluoresensi ing count per detik (cps) saka wektu, nggambarake kemajuan interaksi ing utawa ing sel. Kurva iki bisa viewed ing wektu nyata ing heliOS sajrone pangukuran.
  • Nalika nganalisa sensorgrams, eksponensial sing paling pas kanggo jejak fluoresensi sing diamati ditemtokake lan tingkat kinetik (kon, koff) diekstrak.dynamic-BIOSENSORS-heliX-cyto-Fully-Automated-Laboratory-Analysis-System-FIG-3

Pasif

  • Passivation minangka langkah opsional ing roto, ing ngendi reagen passivation disuntikake menyang chip lan diinkubasi kanggo ngalangi permukaan. Iki bisa mbantu nyegah adsorpsi analit menyang bahan chip.

Normalisasi

  • Langkah normalisasi digunakake kanggo nyathet prabédan tipis ing sinyal amarga pangumpulan sinyal saka saben titik pangukuran dening detektor sing kapisah. Pewarna neon kanthi konsentrasi sing ditemtokake (adhedhasar konsentrasi analit paling dhuwur lan gelar label analit) disuntikake nalika wiwitan tes. Langkah normalisasi iki kanthi otomatis kalebu ing cara pangukuran, lan puncak normalisasi sing diukur digunakake kanggo mbenerake kanthi otomatis beda antarane detektor sajrone analisis data, sadurunge referensi wektu nyata.

Prinsip Pengukuran scIC

Aplikasi scIC

  • Sitometri Interaksi sel tunggal (scIC) ngukur tingkat kinetik lan afinitas analit berlabel fluoresensi sing ngiket lan ora ngiket saka target langsung ing sel urip.
  • Deteksi analit ing scIC ora gumantung saka ukuran lan mulane ana hubungane karo molekul apa wae saka sub-nm nganti> 100 nm lan cocog kanggo kabeh kelas molekul saka molekul cilik, peptida, aptamer, nanobodies, affibodies, antibodi, format antibodi bispecific, protein, kompleks protein, nganti vesikel (partikel) lan virus.

teknologi scIC bisa ngatasi area aplikasi ing ngisor iki:

  • pangukuran sinyal amplitudes ing layar naleni
  • analisis kinetik tarif kon lan koff
  • evaluasi afinitas lan aviditas liwat model pas koff lan biphasic
  • tes spesifik
  • kuantifikasi relatif saka protein membran ing lumahing sel
  • epitope binning lan pasinaon kompetisi
  • tes inhibisi
  • evaluasi internalisasi protein target

heliXcyto Hardware Kapabilitas

Sistem Fluida

  • Sistem fluidik saka heliXcyto diwenehake nganti 3 botol buffer sing beda-beda, ngidini variasi ing buffer mlaku lan pangopènan. Pompa ing heliXcyto bisa disetel kanggo tingkat aliran antarane 20 lan 500 µL/min, katering kanggo s bedaample lan syarat assay. Saluran aliran chip nyambung menyang sistem fluidic liwat rong bukaan. Bukaan sisih kiwa disambungake menyang sample, buffer, lan garis wisuh, nalika bukaan sisih tengen disambung menyang baris regenerasi.
  • Sistem fluidik rong arah iki ngidini panangkepan sel sing stabil nalika nindakake langkah-langkah pangukuran sing beda-beda lan pungkasane regenerasi chip kanggo panggunaan maneh chip ing-assay.dynamic-BIOSENSORS-heliX-cyto-Fully-Automated-Laboratory-Analysis-System-FIG-4
  • Gambar 1. Integrasi chip ing sistem Fluida

Sistem Optik

  • Sinyal fluoresensi bungah dening dioda pemancar cahya abang lan ijo (LED) lan dideteksi dening papat counter foton tunggal, sing nglumpukake sinyal abang lan ijo saka saben titik ing saindhenging ambane saluran.
  • Loro sinyal independen bisa dipantau bebarengan ing titik pangukuran sing padha, ngidini loro interaksi diukur bebarengan ing persiyapan assay dual-werna.dynamic-BIOSENSORS-heliX-cyto-Fully-Automated-Laboratory-Analysis-System-FIG-5
  • Gambar 2. Setup optik
  • Pengumpulan sinyal saka saben titik pangukuran ditangani dening detektor sing kapisah, sing bisa nyebabake bedane sithik ing jumlah mentah. Kanggo nyathet iki, langkah normalisasi kanthi otomatis kalebu ing tes ngasilake data.
  • Saliyane counter foton siji, instrumen kasebut dilengkapi kamera CCD lan mikroskop cahya sing dibayangke. Piranti kasebut ngidini pencitraan sel wektu nyata, mbisakake pambiji integritas sel lan kualitas analit sajrone pangukuran.
  • Persiyapan gabungan iki njamin interaksi lan kahanan biologis dilacak, nyedhiyakake evaluasi lengkap babagan eksperimen.

alur kerja scIC

Proses Pengukuran scIC bisa dipérang dadi 3 langkah utama

  1. Desain Eksperimental ing heliOS: Saben pangukuran diwiwiti kanthi ngrancang eksperimen ing piranti lunak heliOS. Alur kerja tes disetel kanthi milih cara sing wis ditemtokake lan nyetel paramèter eksperimen, kayata garis sel sing digunakake, konsentrasi analit, lan kondisi buffer. heliOS kanthi otomatis ngetung jumlah sel, analit, buffer, lan solusi liyane sing perlu kanggo pangukuran, nyepetake proses persiapan.
  2. Persiapan buffer, analit, lan sel: Sawise desain eksperimen rampung, bahan sing dibutuhake disiapake miturut spesifikasi sing diwenehake dening heliOS. Buffer, analit, lan sel dimuat menyang autos instrumentampmaca.
  3. Pangukuran lan Analisis Data: Sistem kasebut nindakake seri pangukuran interaksi wektu nyata otomatis sing dijadwalake ora mbutuhake intervensi maneh saka pangguna. Data bisa dianalisis nalika pangukuran isih ditindakake kanggo entuk wawasan langsung babagan asil.

scIC Assays ing heliOS

Saliyane tes ngasilake data, piranti lunak kasebut uga menehi cara kanggo uji coba chip, reresik lan pangopènan instrumen.

Tabel 1. Diverifikasi data-ngasilaken assays

scIC Kinetika Ngukur kinetika lengkap ing sel kanthi asosiasi analit sing bisa diatur ing antarane 1 lan 5 konsentrasi, diikuti karo disosiasi siji sawise konsentrasi paling dhuwur.

Saluran ijo utawa abang. Ngandhut pilihan kanggo tes mung Analyte.

scIC Kinetics - Warna Ganda Ngukur kinetika lengkap ing sel kanthi asosiasi analit sing bisa diatur ing antarane 1 lan 5 konsentrasi, diikuti karo disosiasi siji sawise konsentrasi paling dhuwur. Loro saluran ijo lan abang aktif bebarengan. Ngandhut pilihan kanggo tes mung Analyte.
Dissosiasi scIC - Warna Ganda Ngukur disosiasi analit saka sel sing wis diinkubasi kanthi analit berlabel fluoresensi kanthi saluran ijo lan/utawa abang.

Preparasi lan Pangembangan Assay kanggo Pengukuran scIC

Ana sawetara poin sing kudu ditimbang sadurunge nyetel pangukuran scIC

  • Konsentrasi analit, Derajat Labeling, sifat, lan kualitas.
  • Solusi normalisasi lan daya eksitasi.
  • Kualitas lan penanganan sel.

Konsentrasi Analit lan Derajat Labeling

  • Miturut praktik pangukuran kinetik standar, disaranake milih kisaran konsentrasi molar analit 0.1x nganti 10x konstanta disosiasi keseimbangan (Kd) sing dikarepake kanggo kinetika konsentrasi pirang-pirang. Kanggo kinetika konsentrasi tunggal utawa pangukuran disosiasi, konsentrasi analit kudu ana ing antarane 1x lan 10x Kd sing dikarepake. Volume analit sing dibutuhake diwilang kanggo wektu asosiasi 10 menit kanthi laju aliran 25 µL/min total kira-kira 300 µL.
  • Degree of Labeling (DOL) kanggo analit saenipun kudu 1, sanajan nilai DOL 2 utawa 3 isih bisa ditampa. Nanging, elinga yen jumlah label sing luwih dhuwur ing analit bisa nyebabake sifat ikatan, lan bisa nambah kemungkinan agregasi utawa ikatan sing ora spesifik. Kanggo entuk DOL sing optimal, tindakake protokol sing diwenehake karo Kit Label sing ngemot pewarna abang utawa ijo saka garis reagen heliXcyto.
    Normalisasi
  • Normalisasi minangka langkah pisanan ing kabeh cara ngasilake data. Iki menehi ganti rugi kanggo variasi sinyal sing disebabake nggunakake detektor sing kapisah kanggo saben titik pangukuran. Ing langkah iki, pewarna fluoresensi ing konsentrasi sing ditemtokake pangguna disuntikake nalika wiwitan tes.
  • Konsentrasi Solusi Normalisasi diwilang kanthi ngetung konsentrasi analit sing dilabeli kanthi fluoresensi paling dhuwur sing digunakake ing pangukuran kanthi Degree of Labeling (DOL) analit. Konsentrasi iki nuntun daya eksitasi LED sing ditrapake sajrone pangukuran. Tujuane yaiku kanggo puncak Solusi Normalisasi tekan sinyal fluoresensi sing padha amplitude minangka konsentrasi analit paling dhuwur.
  • Deleng grafik konsentrasi solusi Normalisasi ing pandhuan utama kanggo nyetel nilai awal. Elinga yen grafik kasebut nuntun setelan awal, nanging daya eksitasi LED bisa diatur luwih lanjut sajrone pangembangan tes.

Kualitas lan Persiapan Sel

  • Daya tahan sel kudu luwih saka 95%, lan sel umume kudu apik. Kanggo sel adherent, disaranake nggarap sel sing 50-70% konfluen.
  • Kanggo sel suspensi, disaranake panen ing tahap pertengahan log pertumbuhan. 50 µl suspensi sel ing 1E+06 sel/mL dibutuhake saben mlaku.

Panen sel suspensi

  1. Centrifuge kira-kira. 2E+06 sel ing 300 g kanggo 7 menit kanggo mbusak media kultur sel. Buang supernatant.
  2. Cuci sel sapisan kanthi resuspending pelet sel kira-kira. 1 ml DPBS. Centrifuge suspensi ing 400 g kanggo 5 menit kanggo pelet sel urip. Kasebut kanthi teliti, mbusak supernatant kanggo mbusak pecahan lan media.
  3. Resuspensi alon-alon ing 1 ml DPBS, transfer suspensi ing ndhuwur saringan sel lan ketegangan suspensi kanthi aliran gravitasi.
  4. Ukur konsentrasi sel saka suspensi sing disaring lan atur nganti 1E+06 sel/mL.
    • TIP: Sawetara sel suspensi cenderung mbentuk kluster. Alon-alon resuspend kluster lan kalebu langkah straining sadurunge langkah sentrifugasi pisanan.
    • Gunakake tip pipette sudhut amba nalika nangani suspensions sel kanggo ngindhari gaya geser dhuwur nalika transfer utawa resuspension.

Panen sel adherent

  1. Cuci sel nganggo DPBS steril.
  2. Disosiasi sel saka labu kultur nggunakake reagen disosiasi sing disenengi (contone TrypLE).
  3. Resuspend sel sing disosiasi menyang volume media sing disenengi lan saring nganggo saringan sel 30 nm.
  4. Opsional, tambahake EDTA yen sel adherent banget (konsentrasi akhir 5 mM).
  5. Centrifuge sel ing 300 g suwene 7 menit kanggo mbusak media kultur sel. Buang supernatant.
  6. Resuspensi sel dadi 1 mL DPBS.
  7. Ukur konsentrasi sel lan atur nganti 1E + 06 sel / mL.
    • TIP: Media sel sing diencerke 1:4 karo DPBS bisa digunakake kanggo nambah nutrisi menyang selamples ing cilik saka sel sensitif utawa long assay workflow.

Fiksasi sel

  1. Centrifuge nganti 10E + 06 sel ing 300 g kanggo 7 menit kanggo mbusak media kultur sel. Buang supernatant.
  2. Resuspend pelet sel ing 1 mL PBS, centrifuge lan discard supernatant.
  3. Resuspend pelet sel ing 500 µL PBS/2% PFA (62.5 µL saka 16% solusi PFA + 437.5 µL PBS).
  4. Inkubasi sel ing suhu kamar suwene 10 menit (kanthi goyang lembut sing intermiten).
  5. Tambah 500 µL PBS lan sentrifuge suspensi ing 400 g kanggo 5 menit kanggo mbusak PFA.
  6. Buang supernatant.
  7. Resuspensi sel ing 1 mL PBS, saring liwat saringan sel 30 µm, centrifuge (400 g, 5 menit) lan mbuwang supernatant.
  8. Resuspend sel ing babagan 1 mL PBS (opsional: nyetel menyang konsentrasi pungkasan 5E+06 sel/mL).
  9. Simpen sel tetep ing 2-8 ° C, gunakake sajrone sasi.
    • Yen luwih akeh sel sing kudu didandani, mangga ukuran kabeh jumlah sing cocog.
    • CATETAN: Kacepetan centrifugation sajrone panen sel bisa diatur miturut jinis sel, yen sel sensitif lan gaya g sing luwih murah biasane digunakake.
    • Konsentrasi PFA bisa beda-beda antarane 0.5 nganti 4%.

scIC Assay setup

Tes scIC ing ngisor iki kudu dilebokake ing pangembangan tes lan bisa diulang ing alur kerja tes mengko.

Alur kerja pangembangan assay dipérang dadi 3 langkah berturut-turut sing béda:

  1. Test Cyto chip
  2. Tes mung analitik
  3. Pengujian kinetik

Test Cyto Chip

  • Kualitas chip anyar kudu dievaluasi sadurunge nggunakake chip cyto ing pangukuran. Miwiti kanthi mbukak Test Cyto Chip kanthi kapisah. Waca Helix cyto chip bab ing pandhuan utama carane nyiyapake lan netepke test chip.

Analyte Mung Test

  • Pangembangan tes scIC diwiwiti kanthi Analyte Only Test, sing ngevaluasi prilaku analit berlabel fluoresensi ing permukaan chip seger tanpa sel.
  • Tes iki uga bisa diulang kanthi periodik kanggo netepake stabilitas analit sing dilabeli. scIC Analyte Only Test bisa dikonfigurasi ing Kinetics assays kanthi ngaktifake kothak centhang Analyte mung ing setelan Cell.
  • Kanggo pambiji kualitas analit, konsentrasi sing paling dhuwur digunakake cukup lan bisa dikonfigurasi kanthi mateni kabeh nanging siji asosiasi ing assay.

Kinetics Assay Workflow Setup

  • Tes kinetika biasane digunakake ing alur kerja otomatis sing ngemot tes ngasilake data uga unsur pangopènan. Sawise analit wis lulus tes kontrol kualitas Analyte mung, bisa digunakake ing pangukuran ing sel.
  • To quantify kinetic rates reliably, the signal response during association should be concentration-dependent, increasing with higher analyte concentrations.
  • Konsentrasi paling dhuwur kudu tekan dataran tinggi, sing nuduhake yen ikatan stabil wis diraih. Disosiasi kasebut kudu ditindakake kanthi cukup suwe kanggo ngeculake bagean penting saka analit terikat (luwih saka 5%) kanggo ngaktifake pas kurva sing dipercaya.
  • Gunakake paramèter gawan ing kahanan assay minangka titik wiwitan lan atur maneh gumantung saka asil sampeyan.

Example 1. Dianjurake assay workflow

Alur kerja assay ngidini pangguna antri cara pangukuran lan pangopènan adhedhasar kabutuhan eksperimen tartamtu.

Alur kerja assay bisa uga kalebu langkah-langkah ing ngisor iki ing urutan sing dituduhake:

  1. Utama (Maintenance chip)
  2. scIC Kinetics (Sel A, Analit A, Cyto chip)
  3. Sistem Cuci (Chip Maintenance)
  4. scIC Kinetics (Sel B, Analit A, Cyto chip)
  5. Sistem Cuci (Chip Maintenance)
  6. Analyte mung dikonfigurasi scIC Kinetics (Analyte A, Cyto chip)
    • Langkah-langkah Prime lan System Wash ditindakake ing Chip Maintenance. Cuci Sistem kalebu nalika ngalih menyang baris sel sing beda lan sadurunge nindakake Tes Mung Analyte ing mburi alur kerja.
    • Kanggo rincian liyane, waca bagean babagan ngumbah sistem Cyto ing pandhuan utama.
    • Nalika antrian tes kinetika ing sel, nimbang daya tahan sel, sing gumantung ing garis sel.
    • Kanggo garis sel sing sensitif, disaranake mung 1-2 tes saben alur kerja tes. Kanggo garis sel sing luwih tahan banting, tes tambahan bisa antri.
    • CATETAN: Kanggo tes tambahan, nyiyapake solusi sel ing bokor sing kapisah kanthi menehi jeneng sel kanthi beda.
    • Priksa manawa kabeh reagen seger lan disaring liwat saringan 0.22 µm. Pungkasan, selehake reagen sing disiapake menyang instrumen kaya sing ditunjuk dening heliOS.
    • Run bisa diwiwiti kanthi ngeklik panah biru "Run" lambang lan tindakake langkah ing Assay Start Wisaya.
    • Sawise mlaku wis diwiwiti, piranti bisa mlaku kanthi mandiri nganti kabeh alur kerja tes rampung.

Analisis eksperimen scIC

Alur Kerja Analisis scIC

  • data scIC bisa beda-beda saka data biosensor standar amarga kerumitan alam kedadean ing sel dijupuk ing lumahing chip heliXcyto, kang bisa nyebabake irregularities sensorgram.
  • Mula, kontrol kualitas ditekanake kanggo gambar sing dijupuk ing saben langkah pangukuran lan kanggo sensorgram sing digawe ing kaca kebangkrutan analisis otomatis.
  • Kajaba iku, heliOS nyedhiyakake alat kanggo ngatasi irregularities sensorgram sajrone analisis data manual scIC.

proses analisis data scIC:

  1. Pemeriksaan Gambar:
    • Priksa kabeh gambar sing dijupuk sajrone pangukuran (tab Gambar ing jendela eksperimen).
    • Pira sel sing tetep stabil ing jebakan sajrone kabeh pangukuran?
    • Apa kahanan sel? Priksa granularitas lan integritas sel.
    • Apa traps resik sawise langkah regenerasi?
  2. Priksa data mentah:
    • Priksa data mentah kanggo titik referensi 1 lan titik pangukuran 2
    • Sinyal puncak normalisasi kudu cedhak utawa luwih dhuwur tinimbang sinyal data mentah sing paling dhuwur.
    • Apa sinyal bali menyang tingkat garis dasar ing loro titik, utawa ana bukti sing ora spesifik?
  3. Priksa Data Normal:
    • Apa injeksi mlumpat kanggo titik 1 lan titik 2 overlay kanthi bener?
  4. Priksa Data Referensi:
    • Apa langkah regenerasi nggawa sinyal bali menyang garis dasar? Yen ora, mriksa yen ana sel utawa lebu ing traps sawise regenerasi dening reviewing gambar.
    • Apa ana spike, outlier, utawa irregularities liyane ing kurva referensi? Yen mangkono, review gambar kanggo ngenali sabab potensial lan nimbang pangaturan manual.
  5. Priksa Kecocokan Data:
    • Nindakake penilaian kualitas visual
    • Apa pas kanthi njlèntrèhaké prilaku kurva, utawa garis pas nglintasi sensorgram?
    • Apa pas kasebut kanthi tepat nggambarake lengkungan data?
    • yaiku amplitude konsisten karo data referensi?

Analisis Data Otomatis scIC

  • Analisis otomatis scIC ngolah data mentah menyang plot kontrol kualitas lan data sing dipasang mung sawetara klik.
    1. Bukak eksperimen scIC kanthi ngeklik kaping pindho ing eksperimen sing dipilih ing Dhaptar Eksperimen
    2. Klik tombol Analyze biru gedhe ing sisih ngisor tab eksperimen.
    3. Saka alur kerja eksperimen, pilih tes sing pengin dianalisis.
    4. Pilih Kinetics scIC saka jinis analisis sing kasedhiya banjur klik Sabanjure.
      • CATETAN: Yen eksperimen isih mlaku, mung tes sing wis rampung bakal ditampilake ing dhaptar. Sawise tes dipilih, jendhela sabanjure bakal nampilake kabeh jinis analisis sing kasedhiya khusus kanggo metode / tes sing digunakake.
    5. Yen perlu, atur analisis ing jendela ing ngisor iki. Model pas standar yaiku "Kinetika - Tingkat pungkasan gratis" kanthi kothak centhang "Paksa tingkat pungkasan pas menyang Zero" diaktifake. Nyimpang saka model iki mung yen biologi utawa data mbutuhake deskripsi sing luwih rumit.
    6. Sawise konfigurasi wis rampung, klik Analyze kanggo ndeleng kabeh gambar asli, sensorgrams mentah lan diproses, lan nilai kinetika.
  • Amarga kerumitan gawan saka samples digunakake kanggo assays scIC, asil sensorgrams bisa duwe irregularities.
  • Kanggo ngatasi iki, kontrol kualitas gambar lan sensorgram ditekanake ing analisis otomatis.
  • Yen koreksi manual utawa analisis luwih jero dibutuhake, alat kanggo koreksi artefak diwenehake ing Scratchpad analisis manual.

heliXcyto Maintenance lan Dekontaminasi

  • pangopènan heliXcyto penting kanggo njamin kinerja optimal lan umur dawa instrumen. Pangopènan reguler kalebu prosedur reresik sing nyegah kontaminasi lan njaga integritas sistem, supaya asil akurat lan operasi lancar. Perawatan sing konsisten penting kanggo linuwih instrumen lan kualitas asil eksperimen.
    pangopènan heliXcyto mbutuhake rong prosedur utama: Cuci Sistem Cyto, sing bisa digabungake langsung menyang alur kerja assay, lan Resik & Turu, sing ditindakake minangka rutinitas sing kapisah kanggo njaga instrumen sadurunge digunakake sawise pangukuran sewengi sadurunge utawa nalika ora digunakake luwih saka 2 dina.
  • Sistem Wash lan Clean & Sleep mbutuhake anané Chip Pangopènan heliX® ing baki chip.

Rutinitas Resik & Turu

  • Rutin Resik & Turu ditrapake kanggo ngresiki lan mateni / nyimpen piranti. Cara kasebut mbilas pipa fluida piranti heliX® dhisik nganggo banyu ultrapure banjur nganggo etanol 70%. Pungkasan, kabeh tabung dibuwang nganggo hawa.
  • Prosedur reresik iki kanthi otomatis lan njupuk kira-kira 40 menit. Sajrone prosedur kasebut, etanol dibuwang menyang botol banyu, mula isi botol kasebut kudu dibuwang.
  • Sawise Resik & Turu, instrumen mlebu ing mode turu lan ora bisa digunakake nganti Wake Up & Prime ditindakake. Chip Pangopènan heliX® dibutuhake kanggo loro-lorone.
  • PENTING: Kanggo nyegah kontaminasi tabung, pesthekake mbuwang isi botol banyu (campuran banyu / etanol) lan kosongake wadhah sampah sawise prosedur reresik.

Mateni lan panyimpenan jangka panjang

  • Kanggo wektu sing suwe ora bisa digunakake, copot botol sing ngemot banyu lan etanol sawise prosedur Clean & Sleep saka tray buffer lan ninggalake tabung kasebut ing udara.
  • Copot uga heliX® Maintenance Chip, lan simpen ing tas asli. Iki nyegah backflow lan kontaminasi. Pateni piranti.

Sistem cyto wash

  • heliXcyto System Wash ngresiki sistem mikrofluida kanthi nggunakake Cleaning Solution 3 (CS3) sajrone udakara 45 menit. CS3 dijupuk ing rong stages. Jarum pisanan lan sample loop diisi lan diinkubasi kanggo mbusak rereged.
  • CATETAN: Jalanake Cyto System Wash paling ora saben dina nalika piranti digunakake. Disaranake nambahake metode Cyto System Wash menyang alur kerja assay sawise saben tes (nalika ngalih menyang baris sel anyar utawa yen sampkualitas suboptimal) utawa nganti pungkasan alur kerja assay. Exchange pangopènan chip sawise maksimum 50 Cyto System Washes ditampilake minangka Regenerasi count ing tray Chip view saka kontrol Piranti.

Kontak

  • Dynamic Biosensors GmbH
  • Perchtinger Str. 8/10
  • 81379 München
  • Jerman
  • Bruker Scientific LLC
  • 40 Manning Road, Manning Park
  • Billerica, MA 01821

USA

FAQ

FAQ scIC

Apa aku bisa nggunakake maneh chip heliXcyto?

Ya, chip heliXcyto bisa digunakake maneh lan bisa digunakake. Tindakake pedoman reresik lan panyimpenan sing tepat.

Apa tujuan saka Maintenance Chip?

Chip Pangopènan digunakake kanggo reresik, testing, lan operasi pangopènan kanggo mesthekake fungsi sing bener saka sistem.

Sepira kerepe aku kudu ngresiki piranti?

Sistem cairan heliXcyto tetep resik kanthi metode Cyto System Wash lan Clean&Sleep. Sistem microfluidic dianjurake kanggo di resiki liwat Cyto System Wash ing Chip Maintenance sawise saben assay (utamane nalika ngganti jinis sel) utawa paling anyar ing mburi alur kerja assay. Prosedur Clean&Sleep kudu ditrapake sakdurunge digunakake sawise pangukuran dawa sadurunge (contone ing esuk sawise eksperimen sewengi) utawa nalika heliXcyto ora bisa digunakake luwih saka 2 dina mati.

Suwene solusi: RB 1 / banyu / CS 1 / CS 3 / Solusi normalisasi bisa disimpen ing piranti?

Umume, sadurunge saben pangukuran, kabeh solusi kudu ditliti kanggo volume sing isih ana lan kanggo kemungkinan kekeruhan utawa udan. Ing kasus kaya mengkono, solusi kudu langsung diganti. Banyu lan RB 1 kudu diganti saben dina lan RB 1 kudu disaring sadurunge saben pangukuran. Solusi normalisasi sing diencerke bisa digunakake sajrone 2 dina berturut-turut. Solusi Reresik stabil kanggo kira-kira 3 dina.

Suwene aku bisa nggunakake chip heliXcyto?

Tanggal kadaluwarsa saka chip heliXcyto bisa dicenthang ing tab tray Chip ing bagean Piranti ing heliOS. Ora ana jaminan kanggo integritas chip bisa diwenehi sawise tanggal kadaluwarsa. Nanging, anggere jebakan tetep stabil, lumahing resik, lan latar mburi fluoresensi ing ngisor cut-off sing dituduhake ing Chip Test, chip dianggep bisa digunakake kanggo pangukuran. Reresik chip eksternal reguler (Chip Cleaning kit CCK-1-1 disaranake ditindakake sawise panggunaan chip kanggo ndawakake umur chip kanthi signifikan.

Suwene aku bisa nggunakake chip Maintenance?

Chip Maintenance kudu diganti sawise 50 Washes Sistem (dietung minangka regenerasi ing tab tray Chip kontrol Piranti ing heliOS).

Sepira kerepe Tes Chip heliXcyto kudu ditindakake?

Tes Chip ngumpulake informasi babagan latar mburi fluoresensi, kebersihan, lan integritas chip sadurunge miwiti eksperimen anyar. Iku kudu dileksanakake ing paling sapisan nalika chip anyar digunakake, nanging dianjurake kanggo nindakake sadurunge utawa ing awal saben eksperimen kanggo mriksa status chip. Iki ngidini kahanan pangukuran bisa diatur lan kelainan ing sensorgram bisa dilacak menyang chip utawa piranti.

Apa kimia label analit?

A pewarna neon abang utawa ijo, mungguh, ditambahake dening kit labeling kita liwat NHS-ester kanggo amina utami ing analytes protein (contone lisin utawa N-terminus). Rincian lan bagean pemecahan masalah bisa ditemokake ing heliXcyto Labeling Kit pewarna abang (Labeling Kit pewarna abang 2 CY-LK-R2-1) lan heliXcyto Labeling Kit pewarna ijo (Labeling Kit pewarna ijo CY-LK-G1-1 ) saka kita webtoko.

Ing endi golek kapercayan heliOS lan informasi lisensi?

Proses ngetik kredensial lan informasi lisensi diterangake ing bagean Instalasi heliOS ing pandhuan heliXcyto saka kita websitus (panduan heliXcyto). Informasi lisensi sampeyan kudu disimpen ing folder scIC ing Desktop PC heliXcyto, sing digawe dening Spesialis Aplikasi nalika latihan.

Apa kisaran eksitasi/emisi saka heliXcyto?

Eksitasi abang yaiku 605-625 nm, emisi (deteksi) yaiku 655-685 nm. Eksitasi ing ijo 490-510 nm, emisi ing ijo 525-575 nm.

Kaping pirang-pirang aku kudu ngukur eksperimen sing padha kanggo linuwih statistik?

Kanggo entuk tingkat kinetik rata-rata sing bisa dipercaya, 3-4 repetisi saka 3-konsentrasi pangukuran Kinetik dianjurake kanggo ditindakake ing populasi sel sing homogen. Ing set data sing konsisten, tingkat asosiasi lan disosiasi replika kudu ana ing jendela kaping 2-4.

Apa sensitivitas pangukuran scIC?

Watesan deteksi ngisor ing istilah ekspresi target gumantung saka labeling analit, nanging biasane scIC wis bisa ngukur kinetika mung 1000-10000 molekul saben sel. Kanggo nambah sensitivitas, paling ora 5 sel dianjurake kanggo dijupuk, lan analyte DOL saka 5-10 lan daya LED kudu imbang kanggo entuk jumlah fluoresensi maksimum.

Apa watesan deteksi heliXcyto ing babagan tingkat kinetik?

Mangga deleng Spesifikasi teknis heliXcyto kanggo watesan teknis paling anyar, sing bisa ditemokake ing pandhuan heliXcyto (panduan heliXcyto). Konstanta disosiasi Kd: 10 pM nganti 1 mM Konstanta tingkat asosiasi: 1E3 nganti 1E7 M-1s-1 Konstanta tingkat disosiasi koff: 1E-6 nganti 1 s-1 Kanggo informasi rinci, priksa pandhuan heliXcyto saka kita websitus.

Dokumen / Sumber Daya

BIOSENSORS dinamis heliX cyto Sistem Analisis Laboratorium Otomatis [pdf] Manual pangguna
heliX cyto Sistem Analisis Laboratorium Otomatis, heliX cyto, Sistem Analisis Laboratorium Otomatis, Sistem Analisis Laboratorium Otomatis, Sistem Analisis Laboratorium, Sistem Analisis, Sistem

Referensi

Ninggalake komentar

Alamat email sampeyan ora bakal diterbitake. Kolom sing dibutuhake ditandhani *